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核酸蛋白检测仪的基本操作步骤
发布时间:2019-03-13   点击次数:172次
   核酸蛋白检测仪又称紫外检测仪,是液相色谱实验中的一种紫外检测器,配上层析桩、蠕动泵、部分收集器和记录仪等就组成了一套完整的液相色谱系列装置。核酸蛋白检测仪可直接读出光密度A值,且波长准确度和重复性高、单色性好、定性、定量分析中能直接记录各个峰面积的相对峰面值,并能计算质量相对的含量。是生物化学、分子生物学、基因工程、制药、化工、农业、食品以及医院筹有关科研部门和生产单位在分离分析工作中不可缺手段。
 
  核酸蛋白检测仪是自动液相色谱分离层析仪中分离具有紫外吸收物质(蛋白、核酸、多肽、酶)的种紫外检测装置,其原理是根据物质(样品)对紫外光有明显吸收的特征,实现对样品成份含量比对分析,以便进行样品蛋白、核酸物质识别检测和含量测定。可直接读出光密度A值,且波长准确度和重复性、单色性好、定性、定量分析中能直接记录各个峰面积的相对峰面值,并能计算质量相对的含量。
 
  ⑴在核酸蛋白检测仪使用前,首先连接好所需配套仪器:层析柱、恒流泵、自动部分收集器、记录仪(色谱工作站)。将各类插头与插座接妥(220v电源)。
 
  ⑵按下检测仪on电源开关,电源指示灯亮,说明整台仪器电源开始工作,然后观察光源指示灯,如果亮了,表示光源已开始工作,整台仪器可进入工作状态,将检测仪波长旋钮旋到所需波长刻度上,把量程旋钮拨到100%t档(仪器预热20分钟,待基线平直后可加样测试)。
 
  ⑶接通记录仪电源开关,使电源开关拨到“通”指示灯亮。可根据记录仪说明书调换不同的纸速度,用户根据需要自行掌握,测量用10mv档。此时记录仪指针从零点开始向右移动某一刻度,调节检测仪“光量”旋钮使指针停留在记录仪大约中间位置5mv左右数字显示为50左右。。
 
  ⑷把核酸蛋白检测仪进样口聚乙烯塑料管接到恒流泵上,使凝胶层析柱中缓冲液流过检测仪(恒流泵流量视凝胶层析柱大小选1-3ml/min)。用“调零”调整吸光度a值为0(量程开关拨到100%t调节光量旋钮,使记录仪指针在10mv数字显示为100,即透光率为100%。把量程开关拨到“0.0”档,缓慢调节a调零旋钮,使记录仪指示在“o”位,检测仪显示为“o”)。
 
  ⑸以上步骤结束,析系统平衡后即可用洗脱液开始洗脱样品,洗脱前再调一次吸光度0点。洗脱过程结束前不可再调节“调零”旋钮。当洗脱液流过检测仪时,吸光度显示大于零的数值,吸光度数值大小随样品的浓度而变化。洗脱完毕后吸光度显示为稍大于零的数值。
 
  ⑹数字显示吸光度和记录仪自动绘制吸光度图谱是两个互相独立的检测系统,数字显示吸光度与记录仪所绘峰值大小没有直接关系,不可互相换算。
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